Técnicas especiales más frecuentes. Necropsias.

Actualmente se utilizan una serie de técnicas para abarcar la máxima información enzimática, morfológica e inmunofenotípica sobre las muestras citológicas, piezas quirúrgicas y biopsias. 

El patólogo realizará una valoración inicial y pedirá las técnicas que estime más apropiadas tras haber realizado el procesamiento de rutina de tallado, corte y tinción con hematoxilina-eosina (ténica histoquímica) y inclusión en parafina. Las técnicas pueden estar basadas en unión antígeno-anticuerpo, reacciones químicas o biología molecular.

La microscopía electrónica ha sido una técnica complementaria de la Anatomía patológica pero debido al gran éxito de la histoquímica está siendo más utilizado para la enseñanza y la investigación que para la actividad asistencial. Además este método es costoso a la vez que prolongado y su uso actualmente es necesario para el 3-5% de las biopsias, como la renal.

La inmunofluorescencia con anticuerpos marcados permiten demostrar la diversidad de antígenos presentes en tejidos o células. 

La prueba del diagnóstico serológico tiene dos variedades primordiales:

-          Inmunofluorescencia directa: Detecta a los antígenos en un material clínico.

-          Inmunofluorescencia indirecta: Descubre la presencia de anticuerpos específicos en un material clínico o en el suero del paciente frente a un determinado antígeno.

La inmunofluorescencia (con anticuerpos conjugados en fluorescina) se aplica en el diagnóstico de enfermedades cutáneas, vasculitis y mesenquimopatías. Aunque existe un déficit de permanencia de la fluorescencia que requiere microscopia especializada además de un deficiente detalle morfológico.

Los primeros intentos para la determinación del ADN consisten en una óptica de cuarzo y posteriormente a través de la medición de la absorción lumínica en especímenes teñidos con el método Feulden.

Para la determinación objetiva del ADN, existen dos clasificaciones esenciales:

•            Citometría estática: Con una microscopía de luz convencional utilizan un sistema de análisis que captan una imagen celular, la densitometría la analiza y se transforma en un mapa de valores digitales, que se evalúa en un ordenador.
•       Citometría de flujo: Las células suspendidas en un fluido se observan, para saber si pasan con rapidez a varios puntos de uno en uno además de medir algunas de sus propiedades.

Estos sistemas informatizados nos han consentido convertir la imagen celular en una conversión celular. Además con este técnica obtenemos informaciones tales como: Inestabilidad genómica, Expansión clonal y heterogeneidad tumoral.

Rodríguez Martínez R, Romero Ruiz A, Molina Ruiz D, Gómez Salgado J. Técnicas especiales más frecuentes. Necropsias. En: Molina Ruiz D, Gómez Salgado J, Medina Aragón FJ, coordinadores. Cuidados en Laboratorios de Inmunología, Genética, Citología, Anatomía Patológica y Microbiología. 1ª ed. Madrid: Enfo; 2010. p.239-277

Publicado por: Natalia Navarro